цій системі засновано на виявленні в еритроцитах групових антигенів (аглютиногенів) А і В, а в сироватці крові — відповідних їм антитіл (аглютинінів) а і b. Приєднанні відповідних аглютиногенів (А і а чи В і b) відбуваються аглютинація (склеювання) еритроцитів і їхнє руйнування (гемоліз).
Група крові людини є біологічною особливістю, що не змінюється протягом усього . Відомо 4 групи системи АВО.
Групи крові системи АВО
Позначення групи крові | Агглютиногени, що містяться в еритроцитах | Аглютиніни, що містяться в сироватці крові
0(I) | 0 | a і b
A(II) | A | b
B(III) | B | a
AB(IV) | A і B | 0
Визначення групи крові «простою реакцією»
Для визначення групи крові простим методом необхідні 8 очних піпеток (окрема для кожної групи серії сироватки), дрібна тарілка, флакони з ізотонічним розчином хлориду натрію і гемаглютинуючі сироватки 4 груп двох серій.
Визначення крові за допомогою стандартних сироваток називається «простою реакцією». Визначення виробляється на тарілці, на якій восковим олівцем наносять позначення груп сироваток. Спочатку на тарілку наносять по 1—2 краплі стандартних сироваток відповідно зробленим написам у 2 ряди для двох різних серій. У кожну краплю сироватки додають випробувану кров, узяту з пальця чи з вени, і перемішують погойдуванням. Кількість крові повинна бути в 10—15 разів менше, ніж сироватки. За реакцією спостерігають не більш 5 хвилин, після чого роблять висновок про групу крові по наявності аглютинації.
Розрізняють 4 класичні реакції, характерні для 4 груп крові.
Аглютинація (+) при змішуванні крові зі стандартними сироватками
Група крові | Група стандартної сироватки
0(1) | А (II) | У(Ш) | AB(IV)
0(1) | - | - | - | +
А (II) | + | - | + | +
У(Ш) | + | + | - | +
АВ (IV) | + | + | + | -
Аглютинація, утворення «піску» у краплі із сумішшю свідчать про наявність групового антигену.
Подвійна перехресна реакція в сироватці крові хворого
Простий метод визначення групового антигену (групи крові) уточнюється в ізосерологічної лабораторії за допомогою подвійної перехресної реакції — визначенням групових антитіл а і b у досліджуваній сироватці. Вони виявляються за допомогою стандартних еритроцитів А и В, заготовлених від донорів, що мають відповідно А (II) і В (III) групи крові.
У 2 окремі краплі сироватки, нанесені на тарілки, додають стандартні еритроцити груп А и В. Через 5 хвилин визначають результат по наявності аглютинації, що виявляє аглютинін а в крові В (III) групи, аглютинін b у крові А (II) групи, аглютиніни а і b у крові ПРО (I) групи і відсутність аглютинації в крові АВ (IV) групи.
ВИЗНАЧЕННЯ РЕЗУС-ФАКТОРА
Поняття "резус-фактор"
У 85 % людей у крові мається ще один аглютиноген — резус фактор (Rh), а в 15 % він відсутній. На підставі цього кров усіх людей поділяють на резус-позитивну (Rh+) і резус негативну (Rh-). Резус-характеристика є спадкоємної і постійна протягом усього . При будь-якім переливанні крові необхідно точно визначити резус-приналежність реципієнта і донора.
Визначення резус-фактора методом конглютинації
Існує кілька методів визначення Rh-фактора. Найбільш розповсюджений метод конглютинації на чашках Петрі. Для цього дослідження, крім очних піпеток і флакона з ізотонічним розчином хлориду натрію, необхідно мати чашки Петрі, водяну лазню з постійною температурою 46—48 С і стандартні антирезусні сироватки всіх груп системи АВО. Для аналізу беруть антирезусну сироватку двох серій, одногрупну по системі АВО з досліджуваними еритроцитами. У чашку Петрі наносять по 2 краплі антирезусної сироватки, ліворуч — однієї серії, праворуч — іншої в 3 ряди для 3 досліджень. У кожну серію додають по краплі еритроцитів (досліджувані, контрольні Rh-позитивні і контрольні Rh-негативні). Після перемішування чашку Петрі поміщають у водяну лазню на 10 хвилин, після чого розглядають у минаючому світлі.
Наявність аглютинації свідчить про позитивний результат, відсутність її — про негативний. Для контролю в цьому методі використовують свідомо Rh-негативні і Rh-позитивні еритроцити.
Визначення резус-фактора експрес-методом
Останнім часом для визначення резус-приналежності застосовують експрес-метод. Реакцію проводять у пробірках без підігріву. Для цього необхідна спеціальна, універсальна для всіх груп крові системи АВО сироватка, приготовлена особливим способом на поліглюкині.
У пробірку поміщають 1 краплю сироватки, додають 1 краплю досліджуваних еритроцитів і після 3-хвилинного погойдування заливають 3—5 мол ізотонічного розчину хлориду натрію, тричі перевертають пробірку і визначають результат у відбитому світлі. Наявність аглютинації свідчить про наявність Rh-антигену.
Визначення резус-фактора желатиновим експрес-методом
Широко застосовується також желатиновий експрес-метод, заснований на додаванні до крові 1 краплі 10 % розчину желатину і 10-хвилинної інкубації пробірок при +37 °С и додаванні теплого ізотонічного розчину хлориду натрію; роблять перемішування вмісту пробірки. Желатин сприяє зникненню неспецифічної аглютинації.
На цьому ж принципі заснований метод визначення Rh з папаїном.
Любою з цих методів може бути використаний в екстрених випадках. Незалежно від результатів проведених досліджень і наявних даних про ідентичність груп крові донора і реципієнта перед переливанням крові необхідно провести проби на індивідуальну сумісність.