кров і заповнюють камеру; підносять краплю її за допомогою скляної палочки або пастерівської піпетки до краю покривного скла, слідкуючи за тим, щоб кров рівномірно без пухирців повітря заповняла всю поверхню сітки, не затікаючи в рівчики. Кладуть лічильну камеру у вологу камеру на 5 хвилин для осідання тромбоцитів (чашка Петрі з викладеним по краях, змоченою водою, фільтрувальним папером. Готують фазово-контрастний прилад в відповідності з інструкцією.
Проводять підрахунок тромбоцитів в 25 великих квадратах.
Тромбоцити виглядають в лічильній камері у вигляді дрібних утворень.
Розрахунок числа тромбоцитів проводять, виходячи із розведення крові, числа порахованих квадратів (25) і об’єму одного великого квадрата ( мкл, так як сторона квадрата мм, висота мм).
Х – число тромбоцитів в 1 мкл крові;
а – число тромбоцитів, порахованих в 25 великих квадратах.
Практично число підрахованих тромбоцитів множать на 2000.
Уніфікований метод підрахунку в межах крові (по Фоніо). Принцип. Метод побудований на підрахунку числа тромбоцитів в фарбованих мазках на 1000 еритроцитів з розрахунку на 1 мкл (або 1л) крові, виходячи із вмісту в цьому об’ємі кількості еритроцитів.
Реактиви. Застосовують реактив 1 або 2 14% р-н сульфату магнію. 2. 6% розчин етилендиамінтетрацетата натрію (ЕДТА). Змішують кров з реактивом 1 або 2, для цього взятий капіляром Панченкова реактив до мітки “75” вносять в пробірку, потім добавляють кров, взяту тим же капіляром, до мітки “0”. Вміст пробірки перемішують і готують тонкі мазки. Фіксують і фарбують по Романовському – Гімзе на протязі 2-3 г (при використанні реактиву 1) і на протязі 30-45 хв (при використанні реактиву 2). Сухі мазки дивляться під мікроскопом з імерсійним об’єктивом, підраховуючи кількість тромбоцитів в тонких місцях препарату (еритроцити повинні бути розміщені ізольовано). Тромбоцити в мазках виглядають у вигляді фіолетових круглих утворень розміром 2-4 мкм з чітко видимою центральною розміщеною зернистою частиною – грануломером і більш світлою периферичною незернистою зоною – гіаломером.
Підрахунок виконують так: в кожному полі зору мікроскопа рахують число еритроцитів і тромбоцитів, пересуваючи мазок до тих пір, поки не будуть пораховані 1000 еритроцитів. Для кращого підрахунку і більшої точності треба користуватися спеціальним окуляром із зменшеним полем зору.
Розрахунок: кількість тромбоцитів на 1000 еритроцитів складає А0/00. Знаючи число еритроцитів в 1 мкл (в 1 л) крові, легко підрахувати кількість тромбоцитів в мкл крові (в 1 л).
Наприклад А = 600/00, число еритроцитів 5000000 в мкл (5 . 106 /мкл або 5 . 1012/л).
Складаємо пропорцію:
60 – 1000
Х – 5000000, звідси
мкл (300 . 103 / мкл або 300 . 109/л)
Клінічне значення
Зниження кількості тромбоцитів в крові – тромбоцитопенія – є важливим симптомом при деких формах геморагічного діатезу. Найбільше виражена тромбоцитопенія (50 . 103 мкл і нижче, спостерігається при загостренні тромбоцитопенічній пурпурі. Тромбоцитопенія спостерігається при гострих лейкозах в розгорнутій стадії і особливо в термінальній стадії хронічних лейкозів. Помірна тромбоцитопенія (100 . 103 мкл і нижче спостерігається при колагенозах, цирозах печінки.
Підвищення кількості тромбоцитів в крові – тромбоцитоз в крові – характерно для мієлопроліферативних захворювань, спостерігається при злоякісних новоутвореннях. Високий тромбоцитоз (1000 х 103 мкл і більше) може бути у хворих після спленектомії.
Література
Методи клінічних лабораторних досліджень Ю.М. Неменова. Видавництво “Медицина” Москва, 1967 р.
Довідник “Лабораторні методи досліджень в клініці”. Під редакцією професора В.В. Меншикова. Москва “Медицина”. 1987 р.