-Токоферол как фактор ограничения прооксидантного действия хлорида ртути // Тезисы докладов Пироговской студенческой научной конференции (Москва, март 2003). - Вестник Российского государственного медицинского университета. – 2003. – № 2 (28). – С. 169.
10.
Стрельченко Е.В., Иншина Н.Н., Филимоненко В.П. Некоторые механизмы повреждения клеток печени при экспериментальном рабдомиолизе // Тезисы докладов Пироговской студенческой научной конференции (Москва, март 2003). - Вестник Российского государственного медицинского университета. – 2003. – № 2 (28). – С. 211.
11.
Иншина Н.Н. Регуляция активности ключевого фермента биосинтеза гема в печени крыс при введении хлорида кадмия. В кн. “Биология – наука XXI века”: 7-я Пущинская школа-конференция молодых ученых (Пущино, апрель 2003): Сборник тезисов. Пущино – 2003. – С. 335-336.
12.
Стрельченко К.В., Іншина Н.М., Филимоненко В.П. Розвиток оксидативного стресу в печінці та нирках щурів при експериментальному рабдоміолоізі // Збірник трудів 7-го Міжнародного медичного конгресу студентів та молодих учених (Тернопіль, травень 2003) – С. 213.
13.
Strel’chenko E., Inshina N., Barannik T. et al. Possible role of haem intracellular redistribution in signaling under apoptotic agents action // Meeting on signal transduction (Brussels, july 2003). - Eur. J. Biochem. – 2003. – Vol. 270, suppl. 1. – P. 111.
14.
Barannik T., Strel’chenko E., Inshina N. et al. Possible role of newly synthesized heme in signaling under stress agents action // Meeting on signal transduction (Brussels, july 2003). - Eur. J. Biochem. – 2003. – Vol. 270, suppl. 1. – P. 231.
АНОТАЦІЯ
Іншина Н.М. 5-Амінолевулінатсинтазна активність і вміст деяких гемопротеїнів в печінці щурів при дії гемолітичних агентів. – Рукопис.
Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата біологічних наук за спеціальністю 03.00.04 – біохімія. – Харківський національний університет ім. В. Н. Каразіна. – Харків. – 2003.
Дисертація присвячена вивченню особливостей дії гемолітичних агентів на активність ключового фермента біосинтезу гема – 5-амінолевулінатсинтази і вміст деяких гемопротеїнів в печінці щурів.
Встановлено, що при дії хлориду кадмію, хлориду меркурію, фенілгідразину та гліцеролу підвищення 5-амінолевулінатсинтазної активності є однією з причин накопичення вільного гему в печінці щурів. Попереднє введення -токоферолу запобігає підвищенню 5-амінолевулінатсинтазної і триптофан-2,3-диоксигеназної активностей в печінці щурів при дії хлориду кадмію і хлориду меркурію. За умов введення солей металів та фенілгідразину активація 5-амінолевулінатсинтази може бути пов’язана з деградацією основного гемопротеїну печінки – цитохрома Р-450.
Ключові слова: 5-амінолевулінатсинтаза, триптофан-2,3-диоксигеназа, цитохром Р-450, цитохром b5, гем, печінка, хлорид кадмію, хлорид меркурію, фенілгідразин, гліцерол.
АННОТАЦИЯ
Иншина Н.Н. 5-Аминолевулинатсинтазная активность и содержание некоторых гемопротеинов в печени крыс при действии гемолитических агентов. – Рукопись.
Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук по специальности 03.00.04 – биохимия. – Харьковский национальный университет им. В.Н. Каразина. – Харьков. – 2003.
Диссертация посвящена изучению особенностей действия гемолитических агентов различной химической природы на активность ключевого фермента биосинтеза гема – 5-аминолевулинатсинтазы и содержание некоторых гемопротеинов в печени крыс.
Эксперименты выполнены на половозрелых крысах самцах линии Вистар массой 150-200 г. В работе исследовали динамику 5-аминолевулинатсинтазной, триптофан-2,3-диоксигеназной активности и содержания цитохрома Р-450 в печени крыс при введении хлорида кадмия, хлорида ртути, фенилгидразина и глицерола. Исследовали влияние предварительного введения антиоксиданта - -токоферола на изменение перечисленных показателей при введении хлорида кадмия и хлорида ртути. Также исследовали влияние предварительного введения ингибитора белкового синтеза – циклогексимида на изменение 5-аминолевулинатсинтазной и триптофан-2,3-диоксигеназной активностей при введении глицерола.
Активность 5-аминолевулинатсинтазы определяли колориметрическим методом, активность триптофан-2,3-диоксигеназы – спектрофотометрическим методом. О содержании свободного гема в печени крыс судили по отношению активности холофермента к общей активности ТДО. Содержание цитохрома Р-450 и цитохрома b5 определяли методом дифференциальной спектрофотометрии. Оценку значимости различий между группами полученных данных проводили с использованием непараметрического теста Манна-Уитни-Вилкоксона.
В работе установлено, что повышение 5-аминолевулинатсинтазной активности приводит к накоплению свободного гема в печени крыс в первые часы воздействия фенилгидразина и глицерола и в более поздние сроки после введения хлорида кадмия и хлорида ртути. Результаты проведенного исследования позволяют предположить, что при введении солей тяжелых металлов (кадмия и ртути), а также фенилгидразина активация 5-аминолевулинатсинтазы является следствием деградации основного гемопротеина печени – цитохрома Р-450.
Согласно полученным данным хлорид кадмия, в отличие от хлорида ртути, не вызывает накопление свободного гема в печени крыс в первые часы после введения. Увеличение содержания свободного гема в первые часы воздействия хлорида ртути, по-видимому, обусловлено поступлением в печень гема лизированных эритроцитов из кровяного русла путем неспецифического транспорта. В поздние сроки после введения исследуемых солей металлов накопление свободного гема в печени крыс, очевидно, обусловлено повышением 5-аминолевулинатсинтазной активности и деградацией внутриклеточных гемопротеинов, в частности, цитохрома Р-450 и цитохрома b5.
Полученные данные о способности -токоферола предотвращать снижение содержания цитохрома Р-450 и повышение 5-аминолевулинатсинтазной активности, вызванное введением хлорида кадмия и хлорида ртути, позволяют предположить, что деградация цитохрома Р-450 является одной из причин активации 5-аминолевулинатсинтазы при введении солей металлов. Сохранение содержания цитохрома Р-450 и предотвращение активации 5-АЛК-синтазы при введении хлорида кадмия или хлорида ртути на фоне предварительного введения -токоферола сопровождаются нормализацией триптофан-2,3-диоксигеназной активности в печени крыс.
В работе установлено, что фенилгидразин вызывает двухфазное изменение 5-аминолевулинатсинтазной активности в печени крыс: кратковременное снижение и последующее повышение. При введении фенилгидразина, как и при введении хлорида кадмия и хлорида ртути, активация 5-аминолевулинатсинтазы, направленная на восстановление содержания поврежденного цитохрома Р-450, приводит к накоплению свободного гема в печени крыс.
В глицерольной модели рабдомиолиза увеличение 5-аминолевулинатсинтазной и триптофан-2,3-диоксигеназной активностей в печени крыс обусловлено активацией синтеза данных ферментов de novo. Полученные данные свидетельствуют о том, что индукция 5-аминолевулинатсинтазы является основной причиной накопления свободного гема в печени крыс в первые часы после введения глицерола. В более поздние сроки воздействия глицерола одним из источников повышения содержания свободного гема в печени крыс может быть гем поврежденного цитохрома Р-450.
Результаты проведенного исследования свидетельствуют о том, что предупреждение накопления свободного гема в печени млекопитающих за счет сохранения содержания внутриклеточных гемопротеинов и предотвращения индукции 5-аминолевулинатсинтазы может рассматриваться как один из возможных способов ограничения повреждающего действия токсических соединений, в частности солей кадмия и ртути.
Ключевые слова: 5-аминолевулинатсинтаза, триптофан-2,3-диоксигеназа, цитохром Р-450, цитохром b5, гем, печень, хлорид кадмия, хлорид ртути, фенилгидразин, глицерол.
Abstract
Inshina N. M. 5-Aminolevulinate synthase activity and content of some hemoproteines in rat liver during action of hemolytic agents. – Manuscript.
Thesis for the degree of candidate of biological science, speciality 03.00.04 – biochemistry. – V. N. Karazin Kharkov National University – Kharkov. – 2003.
This thesis deals with the investigation of particularity of hemolytic agents action on activity of key heme biosynthesis enzyme - 5-aminolevulinate synthase and content of some hemoproteins in rat liver.
It has been established that an increase of 5-aminolevulinate synthase activity is one of the reasons of free heme accumulation in rat liver under action of cadmium chloride, mercury chloride, phenylhydrazine and glycerol. Pre-treatment by alpha-tocopherol prevents the increase of 5-aminolevulinate synthase and tryptophan-2,3-dioxygenase activities caused by cadmium chloride and mercury chloride. The increase of 5-aminolevulinate synthase activity may be linked with degradation of main hemoprotein of liver – cytochrome P-450.
Key words: 5-aminolevulinate synthase, tryptophan-2,3-dioxygenase, cytochrome P-450, cytochrome b5, heme, liver, cadmium chloride, mercury chloride, phenylhydrazine, glycerol.